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当荧光物质被激发光照射后，激发光的能量就会供给荧光物质，荧光物质吸收能量后发生能级跃迁，即由低能级的基态跃迁至高能级的激发态。而高能级的激发态不稳定，所以会恢复至低能级的基态。 在这过程中，荧光物质吸收的能量就会以光的形式进行释放，从而产生荧光。而事实上，在能量释放过程中还有一部分是被丧失掉的，因此发射光的能量低于激发光的能量，相对应地，发射光的波长要比激发光的波长长。荧光物质发光的整个过程可用Jablonski能量图来表示。
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