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流体中的微粒会影响过滤器的使用寿命,这一点不难理解。当颗粒被过滤器移除时,它们也阻塞了空隙,减少了过滤器中的可用部分。通常,与“干净”的流体相比,微粒浓度较高的流体也会更快地堵塞过滤器。此时,提高有效过滤面积(EFA)可以延长过滤器的使用寿命。
目前各个厂家都提供多种多样的过滤器,从96孔过滤板到离心过滤器和针头式过滤器。以Pall为例,在处理较大体积的样品如100 ml时,可选择25mm Acrodisc PSF针头式过滤器。在处理较少量的样品时,则可选择直径为13mm或4mm的Acrodisc针头式过滤器。这些过滤器,都有多种滤膜和孔径以供选择。
在此提醒大家一下,在选购过滤器时,不单要注意过滤量,还要留意残留体积。在处理成本高昂或异常珍贵的流体时,建议使用残留体积低的过滤器。这样能最大程度降低残留体积,确保样品的完全过滤。
考虑孔径大小
孔径大小将是我们接下来要考虑的因素,这取决于分析仪器。一般来说,对于填料颗粒大于3 μm的标准液相层析系统,我们可以选择0.45 μm的针头式过滤器或流动相滤膜。而对于填料颗粒等于或小于3 μm的系统,如UHPLC,或者关注微生物生长时,建议使用0.2 μm的过滤器/膜。
不过,需要注意的是,不同品牌的等量过滤器,即使过滤级别完全相同,实际的处理能力也存在较大差异。 Pall曾做过实验,在HPLC分析中,若样品未经过滤,仅仅在21次样品注入后,层析柱就因为堵塞而失效;使用其他品牌的过滤器,对0.05%含仪器标定用乳胶球的溶液进行过滤处理,分别在37和487次样品注入后发生堵塞。而使用配备GHP滤膜的Pall公司Acrodisc PSF针头式过滤器,即使在972次样品注入后,层析柱背压也不会增加。这么说来,层析柱的使用寿命延长了46倍之多。