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新型基因编辑工具PASTE,无需DNA双链断裂,实现定点插入超大片段基因

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生命科学的飞速发展,为科学家自由操纵基因提供了前所未有的简便和高效。在分子生物学实验室里,你可以很方便地通过聚合酶链式反应(PCR)将一个基因克隆下来,并连接到相应的表达载体(质粒)上。

遗憾的是,上述的分子克隆实验通常是在原核生物中进行的(例如细菌),但涉及真核生物基因组的操作,特别是几千个核苷酸长度的DNA序列的整合,仍然十分具有挑战性。这也限制了合成生物学、细胞工程和基因治疗等新兴领域的发展。

2022年11月24日,麻省理工学院的 Omar Abudayyeh、Jonathan Gootenberg 等人在 Nature Biotechnology 期刊发表了题为:Drag-and-drop genome insertion of large sequences without double-strand DNA cleavage using CRISPR-directed integrases 的研究论文。

该研究在 CRISPR 的基础上开发了一种名为 PASTE 的新技术,能够以更安全、更有效的方式替换突变基因,可向哺乳动物及人类细胞中定点插入长达36000个碱基的DNA长片段。

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