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最低抑菌浓度(MIC)测定

 胡继光

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        最低抑菌浓度(MIC,minimum inhibitory concentration),是测量抗菌药物的抗菌活性大小的一个指标,指在体外培养细菌18至24小时后能抑制培养基内病原菌生长的最低药物浓度。与之相关的还有最低(小)杀菌浓度MBC。
       一个最低抑菌浓度通常被视为对生物抗菌剂的活性最基本的实验室测量。样品的MIC与同性质药物和一些常用药物的MIC进行比较才有意义,不能单纯通过自己样品的结果就判断出高低,并且不能只用一种细菌。要考虑用不同种类的细菌进行实验,还要做质控。根据抑菌率大小可以判断是否具有抑菌能力。
       可参考以下药敏介绍:
       诸多药敏试验方法中,肉汤稀释法是标准方法,琼脂稀释法也可认为属于标准方法。其他任何方法必须与标准方法比较,才能确定可靠性。其他方法之间相互比较没有太大价值。比较须平行测定耐药菌株和敏感菌株。耐药菌株,被评价方法与标准方法的误差称极重要误差,不得大于3%;敏感菌株,被评价方法的误差称重要误差,不大于7%。
       不同的药敏试验方法,针对不同药物,可靠性不一样。如测MRSA须高盐条件,有的试剂盒中不加盐,结果不准确,但这不影响肠球菌的测定结果。所以,评价一种方法,应该是有针对性地验证一种细菌对一种药物测定结果的可靠性。
        质量控制及其校准作用
        1、纸片法药敏试验
        用敏感菌株做质量控制。此外,ATCC25923,ATCC25922,ATCC27853三个菌株还具备校准作用,此点往往被忽视。在NCCLS有关文件中,质量控制一节的第一部分就是讲方法的校准。由于培养基和操作的原因,国内大部分实验室的药敏试验没有经过校准,试验的准确度差异很大。校准过程中,须注意用适合的参考菌株校准相应菌类的药敏试验。如葡萄球菌药敏试验用ATCC25923校准;肠杆菌药敏试验用ATCC25922校准。
       2、筛选法药敏试验
        必须用耐药菌株做质量控制,最好是低水平耐药菌株。MRS筛选试验以ATCC43300控制。万古霉素筛选试验,以ATCC51299控制。
      3、稀释法药敏试验
       对质量控制要求较高,特别是微量稀释法,必须做质量控制,否则会出现较大误差。具体方法须依照NCCLS文件的有关部分。
       与不同的菌种和不同的药物,breakpoint 是不一样, 对于抗菌实验和结果解释,不同的国家有不同的标准,目前国际上最常用的是美国CLSI的标准,差不多每年都会有更新。其次英国的BSAC标准也有人用,尤其是有些新药在CLSI上没有的,可以参考BSAC, 相对于CLSI, BSAC breakpoint 更低一些。
      全自动生长曲线分析仪用于自动监测微生物或细胞培养过程中温度、振荡条件和不同化学物质对其生长的影响。它能够实时测量200个样品的动力学浊度,显示生长曲线,计算微生物或细胞数量。可用于确定抗菌剂的最小抑制浓度(MIC),或者抗生素等化合物的致死剂量(LD)。
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