桑建伟
下载贤集网APP入驻自媒体
经常在论坛上看到不少朋友对培养基的制备、保存期限和融化等有不同的理解，但多数观点有待商榷！以下是我个人的一些理解，供大家参考讨论！如果错误，请批评指正！
1.培养基制备：
a.制备培养基时应使用蒸馏水，避免采用离子交换器生产的去离子水，其微生物含量可能较高，这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。当然更不能使用自来水制备培养基。
b.制备培养基常用的容器为玻璃、不锈钢铝、锅或搪瓷容器。不宜使用铜或铁锅，培养基中的含铜量过高时（＞0.3mg/1000ml），细菌不易生长；含铁量过高时（＞0.14mg/1000ml），则妨碍细菌毒素的产生。
2.培养基保存期限除特殊说明和标准规定，通常情况下基础培养基（如营养琼脂培养基）应在4℃冰箱中保存不超过3个月，或在室温（20℃）下保存不超过一个月。
不同类别培养期的保存期限培养基2～8℃条件保存期限培养基种类 保存条件 保存时间
平板培养基 不密封 2周
密封 6～8周
试管培养基
（棉塞） 不密封 2～4周密封 8～10周试管培养基（软木塞或腊封） 不密封 8周密封 16～18周
3.培养基的融化
a.将培养基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法（如高压锅中的蒸汽，如100℃）使之融化。经过高压的培养基应尽量减少重加热时间，避免过度加热。许多同行为了达到快速融化琼脂的目的,经常会使用电炉来融化琼脂,这绝对是个非常错误的操作.日本三洋MLS-3750型高压蒸汽灭菌器有自动融化琼脂的功能,我看了一下说明书,该功能下可以使用的温度为60-100℃,程序中自动设定的模式为A.100℃,30分钟;B.100℃,10分钟;C.80℃,50分钟;D.自定义(60-100℃).可见,琼脂融化的温度以不超过100℃为佳.
b.培养基融化后放入47℃±2℃的恒温水浴锅或恒温培养箱中保温，直至使用。
c.融化后的培养基应尽快使用，放置时间一般不应超过4h，不可二次融化。
