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采用两步冷冻法,将胚胎免坐骨神经首先冷冻至四种不同的零下温值,维持一段时间后,再置于液氮中保存一周,结果显示胚胎周围神经-40e温值下维持及液氮中冷冻后,细胞代谢活性及形态结构均得到较好的维持,优于其它三种温值组,提示-40e可能接近胚胎周围神经保存的较理想温值,这与成体神经保存结果相似。
不同的细胞对低温冷冻的温值有严格的选择性,其机理尚不明了。
冷冻损伤的发生机制为:降温过程中的溶质效应,维持温度下的高渗性损伤,继发于快速降温至-196e过程中的细胞内冰晶形成,复温过程中的稀释性休克,以上四方面以示SC核w示髓鞘细胞内冰晶的形成和稀释性休克对细胞损害最重。
DMSD可以保护细胞冷冻至某一零下温值而不受损害,在此温值下维持一段时间后,细胞因缓慢脱水而发生浓缩现象,但无细胞内冰晶形成。此收缩作用可使细胞抵御继发性冷冻至-196e的损伤,并可避免遭受复温过程中稀释性休克的损害。