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可在任意位点精确切割DNA,让分子克隆告别限制性内切酶

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如果你在分子生物学实验室呆过一段时间,那么你就会发现冰箱里总是装满了用于实验的限制性内切酶。这些酶可以识别特定的DNA序列(例如 BamHⅠ内切酶的酶切位点为GGATCC)并将其切割,这也导致可能需要好几种甚至几十种限制性内切酶才能完成常规的分子克隆试验。

令人兴奋的是,来自哈佛医学院/麻省总医院的 Benjamin Kleinstiver 研究团队的一项最新研究,有望彻底淘汰掉这些繁杂冗余的限制性内切酶。

因为CRISPR-Cas核酸酶以可编程的方式裂解DNA,在体外分子应用方面比限制性内切酶更有优势。

该论文以:Precise DNA cleavage using CRISPR-SpRYgests 为题,发表于 Nature Biotechnology 期刊。

该研究开发了一种无 PAM 序列要求的 CRISPR-SpCas9 突变体——SpRY,可以在基因组上几乎任何序列上切割 DNA,成为取代限制性内切酶的强力竞争者,并将拓展 CRISPR-Cas9 基因编辑技术在任意 DNA 序列上的应用。

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