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流式细胞分析技术:可进行多参数、快速的定量分析和分选,怎么做到的?

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流式细胞术(Flow Cytometry)是20 世纪70 年代开发出的一种依赖于流体的细胞学检测技术,简单地说就是对处在快速直线流动状态中的单细胞或其他生物微粒(如细胞核、细菌、染色体、微球等)进行多参数、快速的定量分析和分选的技术。现代的流式细胞分析仪,通常由液流系统、光学系统和电子系统组成。含有微粒的样本被高速流动的鞘液包裹,并被压缩成一条液流直线,使得被检测微粒逐一通过流动检测池(Flow Cell),被激光束照射从而产生信号。流式细胞仪类似于一架显微镜,流式的光学系统相当于显微镜的“光源”,液流系统类似于显微镜的可移动“载物台”,而流式的电子细胞类似于显微镜的“目镜”。

流式细胞术产生的光信号可分为散射光信号和荧光信号。散射光信号分为前向角散射光(Forward Scatter,FSC)和侧向角散射光(Side Scatter, SSC),这两类光信号为微粒的物理参数。FSC 与被测微粒的大小有关,而侧向角散射光是指与激光束正交90° 方向的散射光信号,可提供有关细胞内颗粒性质和复杂程度的信息,根据这些散射光特性可以初步将检测微粒分类。而流式细胞仪的激光可以激发被检测微粒上的荧光基团,从而发出发射光,通过不同的通道收集可以用于被检测微粒上特定染料、探针或特异性荧光抗体,从而反映相应的生物学信息。

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